Formée au métier de comédienne à l'Actors Studio, Jennifer Esposito doit d'abord se contenter d'un emploi de serveuse avant d'apparaître pour la première fois à l'écran dans la série télévisée The City (1995), diffusée sur ABC. De 1997 à 1999, elle joue dans le feuilleton Spin City, où elle interprète Stacy, la secrétaire sarcastique et exubérante du maire de New York, incarné par Michael J. Fox.En 1997, Jennifer Esposito fait ses débuts au cinéma en apparaissant brièvement dans A brother's kiss, un drame de Seth Zvi Rosenfeld. Elle enchaîne ensuite les petits rôles aux côtés d'Edward Burns dans Quitte ou double (1998), de Denzel Washington dans He Got Game (id.) et de Freddie Prinze Jr. dans Souviens-toi... l'été dernier 2 (id.), avant d'être révélée au grand public par Summer of Sam (1999) de Spike Lee.Ses origines italiennes lui confèrent un charme dont elle sait user dans ses films. Ainsi, Jennifer Esposito fait partie des nombreuses prétendantes à vouloir se marier avec Chris O'Donnell dans Le Célibataire (2000) et se transforme en séduisante femme vampire pour les besoins de Dracula 2001 (2001). Prêtant main forte à Michael Douglas dans le thriller Pas un mot (id.), elle séduit Sam Rockwell pour les besoins de Bienvenue à Collinwood (2002), une comédie signée Anthony Russo et Joe Russo.
